實(shí)驗(yàn)案例
2020/12/21 12:03:21
如何結(jié)合液氮使用凈信Tissuelyser破碎組織細(xì)胞
來源：上海凈信
對于一些特別堅(jiān)硬或韌性比較強(qiáng)的樣品，如：皮膚、硬骨骼、軟骨、血管、結(jié)締組織、種子等，使用普通機(jī)械研磨方法很難即保證研磨破碎效果又保證樣品一直處于低溫狀態(tài)。傳統(tǒng)的手工研磨方法雖然能二者兼顧，但是當(dāng)樣品數(shù)量比較多時，手動研磨非常的費(fèi)時費(fèi)力，而且經(jīng)常存在浪費(fèi)樣本、樣本間交叉污染的可能，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果提取RNA、酶等對溫度比較敏感的物質(zhì)，使用液氮進(jìn)行預(yù)處理，保證樣品在破碎過程中一直處于低溫是非常重要的，上海凈信已經(jīng)成功解決這一問題。
使用上海凈信Tissuelyser全自動組織快速研磨儀進(jìn)行組織細(xì)胞的破碎時，將樣品用液氮進(jìn)行預(yù)冷凍，這樣既能保證樣品的破碎效率又能保證樣品一直處于低溫狀態(tài)。以血管和植物葉片為例，具體操作方法如下：
血管：
取新鮮血管，用剪刀剪成若干小塊，然后放入離心管中，再加入凈信研磨珠，蓋上管蓋。將整個試管放入液氮中進(jìn)行冷凍幾分鐘或直到液氮不沸騰，然后放入機(jī)器中處理幾十秒鐘。取出樣品管可見樣品被破碎成乳白色粉末，然后加入提取緩沖液，可以進(jìn)行接下來的后續(xù)提取，加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直為-20℃以下。
葉片：
取植物葉片，清潔葉片表面后放入離心管中，加入幾顆凈信研磨珠，蓋上管蓋。將整個試管和適配器放入到液氮中冷凍幾分鐘或直到液氮不沸騰，然后取出放入研磨機(jī)器中機(jī)器處理幾十秒鐘。取出樣品管可見葉片被破碎成綠色粉末，然后加入提取緩沖液，進(jìn)行接下來的后續(xù)提取即可，加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直為-20℃以下。
